“Técnicas de desinfección y esterilización de materiales y medios de cultivo”.

Me es grato saludarles y con el fin de fortalecer los conocimientos, acerca de la desinfección y esterilización de materiales, les exhorto a que resuelvan éste cuestionario relacionado con el tema de desinfección y esterilización de materiales para la preparación de medios de cultivo. 

Esterilización es la destrucción  o eliminación de todas las formas de microorganismos patógenos. Surge la necesidad ya que en nuestro laboratorio se utilizan en forma repetidas materiales e instrumentos que se encuentran diseñados para reutilizarlos en cada actividad a desarrollar en éste módulo, y esta implica el lavado, desinfección o esterilización entre cada uso específico que se les da a las cajas de Petri, pipetas, matraz m vasos, medios de cultivo  etc.

Los principales objetivos del lavado que se considera la primera etapa del proceso de esterilización son:

Ø  Eliminar  la materia orgánica

Ø  Disminuir la carga microbiana

Ø   Evitar la incrustación en el material de elementos no deseados

Ø  Asegurar las condiciones de limpieza

NORMAS BÁSICAS DE ESTERILIZACIÓN

1.        Limpieza

2.        Desinfección

3.        Preparación y empaque de materiales

4.        Esterilización. 

1.        La limpieza consiste en la remoción de la suciedad mediante la aplicación de la energía química, mecánica o térmica en periodo de determinado tiempo y puede ser:

A)       Química  acción de productos de limpieza  tiene  la finalidad de limpiar por medio de las propiedades de la disolución, dispersión y suspensión de la suciedad. 

B)      Mecánica acción física aplicada sobre una superficie para remover la suciedad resistente a la acción de los productos químicos resistente a la acción del producto químico (fregar, cepillar). 

C)      Térmica acción del calor que reduce la viscosidad de la grasa, facilitando la remoción por la acción química.

Etapas de limpieza. 

 1-Prelavado Lavado (manual o mecánico) 

 2- Enjuague y secado.

ANTISEPTICOS Y DESINFECTANTES

Los antisépticos se usan para las personas.(clorhexidina, yodóforos)

Los desinfectantes se usan para los objetos y superficies inanimadas.(alcoholes, cloro y sus derivados, amonios cuaternarios, fenoles, formaldehido, glutaraldehido, peróxido de hidrógeno estabilizado, ácido peracético etc.

Preparación y empaque del material.

Características:  

1. Resistente.
       Limpio 
           Permeable
   
   
   
   Existen métodos de esterilización muy comunes que se describen en la siguiente tabla:
   Clasificación de métodos de esterilización.
   
   

   MÉTODOS  FISICOS	MÉTODOS QUÍMICOS
   Altas temperaturas	Bajas temperaturas
   Calor húmedo (autoclave )	121°C-134°C Óxido de etileno 55°C Vapor de formaldehido 60°C
   Calor seco (estufa)	Plasma de peróxido de hidrógeno180°C

   
   
   Existen  indicadores que comprueban, que existe un proceso de esterilización completa  además que se consideran muy importantes para verificar el proceso de calidad.
   
   
   a.        Indicadores físicos que son: el termómetro, manómetro de presión, sensores etc.
   b.        Indicadores químicos: éstos monitorean directamente la letalidad en un proceso de esterilización.  (Cinta adhesiva mide la temperatura, vira el color).
   c.        Indicadores biológicos: son los más confiables ya que se utilizan cepas vivas incubadas a 56°C; consiste en seleccionar un organismo de prueba que posee una resistencia mayor a la esterilización.
   
   
       *Se emplean esporas de Bacillus Stereothermophillus como indicador de la esterilización por vapor saturado a presión.
   
   
       *Y también se utilizan como indicador las esporas de Bacillus Subtilis, variedad niger para la esterilización a calor seco.
       
   
   
             Escribir éste cuestionario y resolverlo, en su bitácora relacionado con el tema “Técnicas de desinfección y esterilización de materiales”  y  agregar a éste diez preguntas con sus respuestas después de haber leído y estudiado el tema desarrollado.
     
               Cuestionario 
   
   
   1.        ¿Cuál es la acción destructiva  del calor seco?
   2.        ¿Cuáles son las ventajas de  la esterilización por vía seca?
   3.        ¿Cuáles son las desventajas de la esterilización por vía seca?
   4.        ¿De dónde proviene la acción letal de los microorganismos, en la esterilización por vía húmeda?
   5.        ¿Cuál es el efecto del calor húmedo en  los microrganismos?
   6.        ¿En qué consiste la esterilización por Tyndalización?
   7.        ¿Cuáles son las ventajas de la esterilización por vía húmeda?
   8.        ¿Cuáles son las desventajas de la esterilización por vía húmeda? 
   9.         Investiga las partes de una olla exprés y su función 
   10.      Investiga la función de la autoclave. 
   11.     ¿Qué es asepsia? 
   12.     ¿Qué es antisepsia? 
   13.     ¿En qué consiste la pasteurización?
   14.     ¿Qué es un agente químico? 
   15.     ¿Qué es una agente físico? 
   16.     ¿Qué es un agente antimicrobiano?
   17.     ¿Cuáles  son las etapas de limpieza?
   18.     ¿Qué son los antisépticos y a donde se aplican?
   19.     ¿Qué características tiene el empaque y el material?
   20.     ¿Cuáles son los principales objetivos del lavado?
   21.     ¿En qué consiste la limpieza?
   22.     ¿Cuál es la finalidad de hacer una limpieza química?
   23.     ¿Qué ventaja tiene la aplicación de la limpieza térmica?
   24.     ¿Qué son los indicadores físicos?
   25.     ¿Qué función tienen los indicadores químicos?
   26.     ¿Qué función tienen los indicadores biológicos?
   
   
    

COLORANTES

Muy buenas noches , esperando que se encuentren muy bien , les comparto la siguiente información para que la estudien y la copien en su bitácora, que sirve como sustento de la práctica No. 2.

Fuente de obtención de los colorantes.

Atendiendo a la fuente de obtención, los colorantes se clasifican en naturales y sintéticos.

Colorantes naturales. Los colorantes naturales son básicamente histológicos, encontrándose entre los empleados con mayor frecuencia, los siguientes:

• Índigo: Se obtiene de diversas especie de plantas del genero indigófera que contiene indican, el cual se fermenta para producir el colorante.
• Carmín: Se produce, mediante el tratamiento con alumbre y otras sales metálicas a hembras del insecto cochinilla "Coccus castis".
• Orceína y Tornasol: Se obtiene mediante el procesamiento industrial de líquenes de los géneros: Le canora tinctoria y Rosella tinctoria.
• Hematoxilina: Este colorante se extrae con éter de la madera de un árbol oriundo de México y de algunos países suramericanos denominados Hematoxilium campechianum.

Colorantes sintéticos. Se obtiene de la anilina, o es mas exactamente del alquitrán de hulla siendo todos derivados del benceno.

Clasificación

Los colorantes se clasifican, teniendo en cuenta si la propiedad tintorial se encuentra en el anión o el catión de su estructura química. Sobre esta base se pueden dividir en tres grupos: básicos, ácidos y neutros.

• Colorantes básicos: La acción colorante está a cargo del catión, mientras que el anión no tiene esa propiedad, por ejemplo: - cloruro de azul de metileno+.
• Colorante ácido: Sucede todo lo contrario, la sustancia colorante esta a cargo del anión, mientras que el catión no tiene propiedad, por ejemplo: eosinato- de sodio+
• Colorantes neutros: Están formados simultáneamente por soluciones acuosas de colorantes ácido y básicos, donde el precipitado resultante, soluble exclusivamente en alcohol, constituye el colorante neutro, que tiene la propiedad tintorial de sus componentes ácidos y básicos, por ejemplo: la giemsa.

Afinidades tintoriales.

En el proceso de la coloración, ocurre una combinación de reacciones físicas y químicas.

• Reacción física.

Ocurre un fenómeno de absorción similar al que tiene lugar en las materias porosas, considerando que el colorante penetra en los intersticios del cuerpo coloreable y se mantiene allí por la cohesión molecular. 

• ·         Reacción química

Las células microbianas son ricas en ácidos nucleicos que portan cargas negativas en formas de grupos fosfato combinándose como colorante básicos cargados positivamente. Los colorantes ácidos que tienen la acción colorante en el anión no tiñen la célula, se emplean como colorante de contraste para colorear su entorno, como por ejemplo: la tinta china o la eosina que no colorea al microorganismo, pero si el fondo del campo microscópico.

Toxicidad de los colorantes. Ventajas y Desventajas.

Los colorantes son sustancias tóxicas, por lo tanto el proceso de la tinción generalmente resulta letal para los microorganismos, provocando su inmovilización, lo cual puede significar una ventaja o desventaja para el investigador según sean los objetivos con la sustancia colorante. Veamos algunos Ejemplos:

1. Al ocasionar la muerte de los microorganismos sometidos al proceso de tinción se reducen las posibilidades de contaminación para el manipulador.
2. Los colorantes pueden ser tóxicos para el manipulador, algunos incluso han resultado cancerígenos por lo que ha habido la necesidad de retirarlos del mercado.
3. Algunos colorantes solo tienen afecto letal para determinadas especies o géneros bacterianos, siendo utilizados como constituyentes de medios de cultivo selectivo para impedir el desarrollo de microorganismos indeseables y favorecer el desarrollo de las especies que nos interesa estudiar. Por ejemplo: el verde de malaquita.
4. Otros se emplean como desinfectantes microbianos, más que para teñir, con fines de microscopia, por sus propiedades bacterianas o bacteriostáticas.
5. Algunos tipos de colorantes son empleados no para teñir, sino como indicadores de pH, formando parte de la composición de los medios de cultivo para indicar los cambios de basicidad o acidez que se vayan produciendo en el medio como consecuencia de su actividad metabólica. Ejemplo: rojo fenol, azul de bromo timol entre otros.